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    LLC小鼠Lewis肺癌細胞傳代/復蘇技巧
    點擊次數:58 更新時間:2024-04-18

    LLC小鼠Lewis肺癌細胞

    Mouse Lung Cancer Cells

    貨號:YJ-m027(種屬鑒定)

    價格: 1800.0

    規格: 1*10 6

    細胞介紹

    該細胞為HPV16E6、E7ras基因共轉化的C57BL/C(H-2b)小鼠肺上皮細胞。

    細胞特性

    1 來源:小鼠,肺

    2 形態:上皮樣細胞  貼壁生長

    3 含量:>1x106  細胞數

    4 規格:T25瓶或者1mL凍存管包裝

    5)  用途:僅供科研使用。

    對于貼壁細胞傳代可以參考以下方法:

    1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

    2. 加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養瓶中(T251-2mL,T752-3mL),置于37℃培養箱中消化1-2分鐘(難消化的細胞可以適當延長消化時間),然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加入3-4ml10%FBS的培養基來終止消化。 

    3.輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。將細胞懸液按12的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照說明書要求配置的新的完全培養基以保持細胞的生長活力,后續傳代根據實際情況按1:2~1:5的比例進行。

    3)細胞凍存: 收到細胞后建議在培養前3代時凍存一批細胞種子以備后續實驗使用。

    LLC小鼠Lewis肺癌細胞.png


    下面T25瓶為例;

    1. 細胞凍存時按照細胞傳代的過程收集消化好的細胞到離心管中,可使用血球計數板計數,來決定細胞的凍存密度。一般細胞的推薦凍存密度為1×106~1×107個活細胞/ml.

    2. 1000rpm離心3-5min,去掉上清。用配制好的細胞凍存液重懸細胞 ,按每1ml凍存液含1×106~1×107個活細胞/ml分配到一個凍存管中將細胞分配到凍存管中,標注好名稱、代數、日期等信息。

    3. 將要凍存的細胞置于程序降溫盒中,-80度冰箱中過夜,之后轉入液氮容器中儲存。同時記錄好凍存管在液氮容器中的位置以便后續查閱和使用。

     

     

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